农业基础科学论文_苏云金芽胞杆菌等离子复合体
文章摘要:【目的】苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis (Bt) D18对鳞翅目,鞘翅目等农业害虫具有杀虫毒力,本研究拟通过复合诱变育种,筛选出杀虫毒力更高的突变菌。【方法】经四轮室温常压等离子体诱变(ARTP)和一轮ARTP-NTG复合诱变后,镜检形态观察与生物毒力测定筛选高毒力菌株,SDS-PAGE检测Cry蛋白,qRT-PCR定量cry基因的表达揭示突变菌株毒力提高的原因。【结果】复合诱变筛选到两株高毒力突变菌株An-L5-1和An-L5-7(CCTCC M 2020263),与出发菌株Bt D18相比,An-L5-1和An-L5-7的生长衰亡期略微提前;芽胞形成能力增强;Cry蛋白表达量分别提高了80.47%和88.31%;对小菜蛾和黏虫的杀虫毒力显著增强。【结论】突变菌株An-L5-1和An-L5-7杀虫活性提高主要是由于毒力基因cry1Aa,cry2Aa和sigK调控基因的表达显著上调。
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