蔬菜农药残留会对人体健康造成严重影响[1]。五氯硝基苯和百菌清属保护性杀菌剂，前者对蔬菜苗期病害防治效果较好，但其毒性危害、环境污染、农药残留等问题日益突出，已在多个国家被禁用或限制使用[2]；后者对多种作物真菌病害具有预防作用，黏着性较好、但残效期长，对生态环境和食品安全具有潜在威胁[3]。我国对蔬菜中五氯硝基苯和百菌清残留均规定了检测方法和限量标准[4-5]，但其检测方法的样品前处理操作较为复杂。样品前处理是影响检测速度和准确度的关键环节，目前农药残留检测前处理技术主要有固相萃取、固相微萃取、分散固相萃取(QuEChERS)、凝胶净化、超临界液体萃取及分子印迹技术等[6-7]，其中QuEChERS是近年发展起来的一种快速样品前处理技术，其回收率高、分析速度快、溶剂使用量少、操作简便，现已逐步应用于农药残留检测中[8-9]。本文在以前研究基础上[10-16]，优化建立了气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)测定蔬菜中五氯硝基苯和百菌清残留量的QuEChERS 样品前处理方法，其应用将有利于降低环境污染、保障分析人员健康和促进食品中农药残留监测水平提升。现报道如下。

1材料与方法

1.1仪器与试剂

5957C型气相色谱-质谱联用仪(Agilent公司)，DN-24W型氮气吹干仪(上海比朗仪器制造有限公司)，AL204-1C型分析天平(Mettler Toledo公司)，XH-1型涡旋混匀器(江苏康健医疗用品有限公司)，543OR型离心机(Eppendorf公司)，弗罗里矽固相萃取柱(Florisil-SPE柱，北京振翔科技有限公司)，QuEChERS柱(CNW公司)。五氯硝基苯标准品(99.0%，C， GmbH)，百菌清标准品(98.0%，C， GmbH)，正己烷、乙腈、丙酮 (色谱纯)及其他试剂均为分析纯。空白样品为现行农业行业标准DB-1毛细管柱气相色谱电子捕获检测法[5]未检出五氯硝基苯与百菌清残留的蔬菜，检测样品为市场购买蔬菜。

1.2方法

1.2.1仪器条件 色谱条件：DB-35 MS石英毛细管色谱柱(30 m×0.25 μm×0.25 μm)，程序升温(40 ℃保持1 min, 30 ℃/min升温至130 ℃，5 ℃/min升温至250 ℃保持5 min)，进样口温度260 ℃，载气为高纯氦气(纯度>99.999%)，柱流速1.2 mL/min，不分流进样。质谱条件：EI离子源温度230 ℃，电子能量70 eV，传输线温度280 ℃，溶剂延迟10 min，选择离子扫描(SIM)，五氯硝基苯定量离子295、定性离子237和249，百菌清定量离子266、定性离子264和268。

1.2.2标准溶液的配制 精密称取五氯硝基苯和百菌清标准品各0.001 g于10 mL容量瓶中，用正己烷溶解并定容，即得0.100 g/L五氯硝基苯和百菌清混合标准溶液。

1.2.3样品的前处理方法 本研究前处理方法：样品匀浆处理后精密称取15 g，加入氯化钠5 g和正己烷20 mL，涡旋混匀5 min，20～30 ℃超声提取30 min，加入无水硫酸钠8 g，充分振荡，4 000 r/min离心5 min，取上清液10.0 mL经QuEChERS柱净化后，氮气吹至净干，用正己烷定容至1.0 mL，1.0 uL进样测定。现行农业行业标准NY/T 761-2008前处理方法[5]：样品匀浆处理后精密称取25.0 g，加入乙腈50.0 mL，高速匀浆2 min后用滤纸过滤，收集滤液40～50 mL至装有5～7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，剧烈震荡1 min，静置30 min，吸取乙腈溶液10.0 mL于150 mL烧杯中，80 ℃水浴氮气至近干，加入正己烷2.0 mL，倒入预淋洗处理后的Florisil-SPE柱，用5 mL丙酮+正己烷(10+90)冲洗烧杯后淋洗Florisil-SPE柱，重复1次，收集洗脱液，于50 ℃水浴氮吹至<5 mL，用正己烷定容至5.0 mL，1.0 uL进样测定。

2结果

条件优化试验

2.1.1提取溶剂的选择 取空白样品，分别加入五氯硝基苯和百菌清各1、3、5 μg，按1.2.3前处理方法操作，并分别以乙腈和正己烷为提取溶剂，在1.2.1条件下测定，比较两者的提取效率，结果显示，正己烷的提取效率优于乙腈。见图1。

图1 不同溶剂对回收率的影响Fig.1 Effect of different solvents on recovery rate

2.1.2超声温度对提取效率的影响 取空白样品，加入五氯硝基苯和百菌清各3 μg，按1.2.3项下的前处理方法操作，并改变超声温度，在1.2.1条件下测定。结果显示，五氯硝基苯和百菌清的提取效率在20～30 ℃时最高。见图2。

图2 超声温度对提取效率的影响Fig.2 Effect of ultrasound temperature on extraction efficiency

2.2专属性试验

取15 g空白样品，加入50 μL混合标准溶液，按1.2.3项下的前处理方法操作，按照1.2.1条件采用全扫描模式测定，经NIST谱库检索结果显示，色谱峰1为五氯硝基苯、保留时间为14.128 min，色谱峰2为百菌清、保留时间为14.966 min，两峰完全分离。见图3。